系统地相识猪chang的基本qing况、生产状态、临床状态、免疫配景、猪伪狂犬病的熏染和免疫状态是制订高效防控和净化方案的条件和基础。

    1 猪chang伪狂犬病摸底视察的内容

开展周全的猪chang摸底视察，有助于更科学地制订伪狂犬病的控制和净化措施。

1.1 猪chang基本qing况网络：猪chang基本qing况网络：包罗猪chang结构、周边养殖qing况、生产模式、硬件设施、存栏量、生产流程、治理水平、兽医团队和生物清静防控措施等基本信息。

1.2 猪chang生产数据：包罗配种临盆率、流产率；断奶至发qing距离天数；产仔数、健仔数、死胎、木乃伊胎、弱仔数；以及产房、保育、育肥阶段的成活率等。

1.3 猪群当前的生产qing况和临床体现：猪群是否稳固？中大猪是否有呼吸道疾。勘Ｓ硎欠裼泻粑篮蜕窬⒆？产房小猪是否有神经症状，顽固性腹泻？母猪是否有流产等异常体现？近期是否有引种运动？

1.4 免疫配景：主要疫病的免疫法式（如猪瘟、伪狂犬病、蕴厥狻毒、蓝耳病等）；疫苗厂家、毒株、免疫时间、免疫剂量等。

1.5 实验室检测数据：网络猪chang主要疫病的检测数据，特殊是猪伪狂犬病病原和抗体监测效果。只管整理后备种猪入群监测效果，精液病原检测效果，母猪、仔猪gB/gE抗体监测效果等。若是猪chang近期没有相关实验室检测效果，可以凭证猪chang生产qing况和猪群临床qing况，制订检测方案，并收罗响应样品送实验室检测。

2 病原学检测及效果应用

    在猪群泛起异常qing况，疑似发生猪伪狂犬病时，主要使命是收罗病原学样品举行实验室诊断。

    2.1 病原学样品收罗

2.1.1异常猪样品。伪狂犬病毒熏染猪只从鼻渗透物、唾液、乳汁和尿中倾轧病毒。收罗殒命和发病猪的病料（脑、扁桃体、脾脏、肺脏、淋投合）、流产胎儿组织、活猪的扁桃体、鼻拭子等样品。

2.1.2精液样品。每月定期收罗种猪的精液样品举行伪狂犬病原检测。

2.1.3样品包装和送检。收罗的样品需划分装入防渗漏的容器中，并实时冷藏送检（建议使用足量的冰块保持低温）。若是无法连忙送检，样品应冷冻生涯。猪chang在送检时还应认真填写采样单，并与样品一同寄送。这样做可襶uan苊庋坊煜，并确保实验室能够实时、准确地举行检测。

2.2 检测要领

猪伪狂犬病原检测可接纳动物接种、细胞疏散判断、分子生物学检测等要领。PCR（聚合酶链反映）因其快速、敏感和特异性强等优点而被普遍应用。PCR手艺能够同时处置赏罚大量样品，而且支持活体检测，很是适合临床诊断。

由于伪狂犬病毒核酸DNA的高GC含量，举行PCR扩zeng时需要选择适合高GC含量的扩zengmix或buffer。通俗PCR要领可以参照《GB/T 18641-2018伪狂犬病诊断要领》执行，而双重荧光PCR则可an照《GB/T 35911-2018伪狂犬病毒荧光PCR检测要领》操作。

当检测到猪伪狂犬野毒阳性时，对于规模猪chang或养殖集团，建议举行遗传变异剖析，襶uan愀嫉刂傅嘉笨袢呙绲难≡。值得注重的是，自2012年以来检测到的野毒大多数为变异毒株。

2.3 检测效果的应用

一旦猪chang检测发现伪狂犬野毒阳性（gE基因阳性，Ct值越低，批注病毒含量越高），对于体现出显着临床症状的猪只，应接纳镌汰或隔离措施。同时，猪群全群需要紧迫免疫接种猪伪狂犬活疫苗1-2头份。若是精液病原检测呈阳性，相关精液应连忙弃用，且公猪建议镌汰。这样的措施有助于控制病qing的扩散，保障猪群康健。

3 血清学监测及效果运用

猪伪狂犬病的病毒血症期较短，中大猪熏染后可能不体现显着的临床症状。当前，猪chang普遍使用的猪伪狂犬疫苗为gE基因缺失疫苗。因此，通过血清抗体（gB/gE抗体）检测，可以有用掌握猪群的熏染qing况和免疫状态。

3.1 血清样品收罗方案

在视察群体中的盛行病qing况时，全群采样wangwang不行行。因此，需接纳抽样视察的方式，通过样本的视察来推断总体qing况。抽样视察应兼顾准确性、效益性和现实可操作性，确定合适的样本容量，既能知足统计模子的需求，又能降低数据网络难度和成本。在生产实践中，常用的抽样方案如下：

3.1.1 猪群证实无疫或发现疫病的抽样

凭证国家猪伪狂犬病净化尺度，对于生产公猪存栏量在50头以下的qing况，实验100%采样；对于存栏量凌驾50头的，an照证实无疫的公式盘算(CL=95%，P=3%)举行随机抽样。同样，生产母猪和后备种猪也an照证实无疫的公式(CL=95%，P=3%)举行随机抽样，以确保差异猪群的代表性。

3.1.2 分阶段一连性监测

为了更准确地掌握猪群的康健状态，可以将猪群an照生产流程分为多个小群体。例如，将种猪分为种公猪、后备母猪、有身中期、有死后期和哺乳期母猪群；将仔猪/肉猪群an年岁阶段举行分群，如分为4周龄、8周龄、12周龄、16周龄、20周龄、24周龄等小群体，或an照周龄举行分群。每个阶段或每个小群体中，收罗10-15份样品举行监测。对于种公猪，应实验所有采样监测；而在基础母猪采样时，应兼顾差异胎ci的母猪。这种采样方案能够基本掌握各阶段猪群的免疫状态和康健状态。

3.1.3 后备引种、入群监测

对于后备种猪，在引种前应an照10%-20%的比例举行采样监测，若有须要，可实验所有采样监测。在后备种猪入群前，应举行周全采样，对其举行主要疫病的抗原抗体监测，以确保新引入的种猪不会带来新的疾病风险。

3.1.4 免疫效果监测

疫苗免疫后3-4周随机收罗30份左右的样品举行抗体监测。

3.2 检测要领

血清学检测主要包罗乳胶凝聚试验、血清中和试验、ELISA（酶联免疫吸附试验）、免疫金标和直接免疫荧光法等。

3.2.1 血清中和试验

PRV血清中和试验是OIE的法定检测要领，其特异性、敏感性较好。凡能与病毒团结，使其失去熏染力的抗体称为中和抗体。PRV的一系列糖卵白、非糖卵白和结构卵白的抗体都可以抑制病毒在体内或体外的复制，可是它们起到的作用水平纷歧。研究批注，针对gC和gD的补体依赖性病毒中和抗体是最有用的。gC抗体具有抑制病毒在靶细胞上黏附的作用，而gD抗体则能抑制病毒穿入细胞，从而阻断熏染的第一阶段。在恢复期，抑制病毒复制的主要抗体是针对gC的抗体，而gB抗体也可以促进猪的免疫掩护作用。中和抗体的水平不是由某个单一抗体决议的，而是由多个抗体配相助用的效果。权衡中和抗体水平的一个要领是通过中和试验，gai试验可以测出血清中和病毒的中和效价，效价越高说明中和病毒的能力越强。然而，由于中和试验手艺条件要求较高、时间较长，因此主要用于实验室评价。此外，统一份样品对差异伪狂犬毒株的中和效价可能存在差异，因此在检测中和抗体效价时，应针对主要盛行毒株举行测定。

3.2.2  ELISA抗体检测

ELISA具有特异性强、敏感度高、操作轻盈、重复性好等特点，是最轻盈的要领之一，获得了许多国家的认可。现在已有成熟的商品化伪狂犬gB-ELISA和gE-ELISA抗体检测试剂盒。gB-ELISA试剂盒包罗间接ELISA和竞争ELISA两种形式，而gE-ELISA试剂盒多接纳竞争ELISA。当前，猪chang使用的疫苗都是gE基因缺失疫苗，免疫后不会发生gE抗体，但会发生gB抗体。野毒熏染后可发生gB抗体和gE抗体。伪狂犬的母源抗体（gB/gE抗体）一连时间较长，通常gB抗体可一连8-10周以上，而gE母源抗体可一连至100日龄左右。在剖析伪狂犬gB/gE抗体时，应注重以下几点：

（1）gB抗体阳性可能是免疫抗体、母源抗体或熏染后发生的抗体。

（2）gB抗体阳性并不意味着具有掩护力。例如，IDEXX的gB-ELISA中，当S/N≤0.6时判为抗体阳性，但通常要S/N≤0.2（履历值，差异的试剂盒有差异）才具有较好的掩护力。

（3）gE抗体阳性可能是熏染抗体或母源抗体。通常来自母源抗体的gE抗体一连时间不凌驾120日龄，120日龄以上的gE抗体阳性应视为熏染抗体。

（4）gB和gE抗体是否同步可以作为猪群伪狂犬活跃度的一个指标。gE抗体阳性种猪举行疫苗免疫后，若是未被野毒再ci熏染，则体现为gE抗体滴度逐渐下降，而gB抗体免疫后呈上升状态，泛起gE抗体与gB抗体差异步的征象。免疫后的种猪若是近期被野毒再ci熏染，则体现为gB和gE抗体滴度同步升高，且由于野毒株的免疫原性更好，其gE抗体滴度更高。

猪伪狂犬gB抗体间接ELISA试剂盒的敏感衴uan染赫鵈LISA低，但gB抗体滴度与中和抗体具有一定的平行关系。临床检测中常通过检测gB抗体来推测中和抗体滴度。百测/普泰的伪狂犬gB抗体ELISA试剂盒是间接ELISA，其S/P值与血清中和抗体存在较好的线性关系。

差异厂家生产的伪狂犬gB-ELISA和gE-ELISA检测试剂盒，在判断尺度和效果解读上存在一定的差异。因此，在剖析效果时，必须相识差异试剂盒的特征及其解读要领，特殊是检测效果与临床体现或掩护效果之间的关联。这样才气确保准确评估猪群的免疫状态和熏染风险，从而接纳适当的防控措施。

3.3 检测效果剖析的应用

3.3.1 评价gE抗体阳性种猪伪狂犬熏染/免疫状态

通太过析差异阶段母猪群的gE抗体阳性率，可以评估其熏染状态。使用gB抗体阳性率、均值和离散度来评价免疫状态。此外，通太过析gB和gE抗体是否同步转变，可以评估伪狂犬病的活跃度（详见表3）。通过较量差异胎ci母猪的gE抗体qing况，可以评估后备猪入群后伪狂犬病的熏染qing况，以及种猪群之间水平撒播的qing况。

3.3.2 评价仔猪gB/gE抗体消长纪律

网络差异周龄的仔猪/肉猪血清样品，确定gE抗体转阳和gB抗体消逝的时间点，从而评估猪群中伪狂犬病发生熏染的阶段（表3）。在制订免疫法式时，需要思量病原的潜在期、疫苗起效时间以及疫苗免疫掩护期等因素。伪狂犬病的潜在期为2周，活疫苗的起效期约为1周。对于阳性不稳固的猪。梢云局E抗体转阳和gB抗体消逝的时间点，团结临床猪群康健治理水平来制订免疫法式。建议在gE抗体转阳点前3～4周举行第二ci肌注免疫，并再wang前推4～5周举行第一ci肌注免疫。

3.3.3 伪狂犬gE阳性稳固chang/阴性chang首免日龄简直定

有试验批注，伪狂犬中和抗体半衰期为14天。针对伪狂犬稳固chang或阴性chang免疫法式的评估，可检测4周、6周、8周仔猪血清中和抗体或gB抗体（间接ELISA与中和抗体的对应关系，咨询响应的检测试剂供应商），首免疫日龄为中和抗体的2log2倍。如: 28日龄的中和抗体为5log2，伪狂犬中和抗体半衰期为14天，则血清抗体将至2log2时，则首免日龄=28+（log2⁵-2log2²）x 14天=70日龄。

总之，在综合思量准确性、经济性和现实操作性的基础上，应多维度网络猪chang伪狂犬的基本qing况，并有妄想地开展猪伪狂犬病抗原和抗体监测。通过综合评估猪chang伪狂犬病毒的熏染状态和免疫状态，为猪chang伪狂犬病的控制和净化事情奠基坚实的基础。